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乳腺髓样癌细胞 , Bcap-37细胞5×10^5以上/1ml
对于大多数细胞研究工作者来说,乳腺髓样癌细胞 , Bcap-37细胞污染那可是个糟糕的事情,也是比较容易出现的情况,我们如何防范,如何避免,是我们要学习和掌握的。
磷脂酰肌醇聚糖F(PIGF)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Phosphatidylinositol Glycan F (PIGF) Homo sapiens (Human)
肾母细胞瘤蛋白1(WT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Wilms Tumor Protein (WT1) Homo sapiens (Human)
乳腺髓样癌细胞 , Bcap-37细胞D-氨基酸氧化酶激活因子(DAOA)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for D-amino Acid Oxidase Activator (DAOA) Homo sapiens (Human)
D-氨基酸氧化酶(DAO)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for D-Amino Acid Oxidase (DAO) Homo sapiens (Human)
Ⅹ型胶原(COL10)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Collagen Type X (COL10) Homo sapiens (Human)
下面我们对细胞培养中常见的污染情况,做个总结:
1)原虫:培养液可轻微浑浊,显微镜下那些细小的点状物数量非常多,轻微活动,细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢,而且细胞状态不好,边缘不清楚,细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的,但他们的数量小,细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长,只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长,zui终形成恶性循环。
2)霉菌:培养液是清亮的,倒置显微镜下无杂质,37度孵箱培养2-3天,仍清亮,但出现絮状杂质,镜下可见呈细丝状的团状漂浮物,可看到明显的菌丝,细胞仍可生长,但时间长之后,细胞的活力状态变差,用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内,再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后,可把所有细胞暂时转移,采用过氧乙酸擦洗孵箱(包括隔板,箱壁)。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时,使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后,再移入细胞。孵箱应定期清洁(2月左右),尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是:用84液擦洗-清水擦洗-75%酒精擦洗-紫外灯照。预防霉菌污染,可在培养基里加3u/ml的两性霉素或或或双抗;但细胞一旦污染,很难挽救,或或双抗都于事无补,建议舍弃该污染细胞。,将环境消毒,如果所有细胞都污染,可能是系统污染,检查一下培养基和器材,如果只是个别污染,可能是操作问题,就要注意操作。
3)细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象! 可在培养液中加相应的抗生素处理
4)黑蛟虫:可以穿透滤膜,也可以通过空气传播,低倍下为黑色点状,高倍下可看见黑色的小虫游来游去,培养液也是不浑的,一般不会太影响,细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好,且观测到的运动物无明显增多,且培养液颜色、透明度无明显变化,可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响,在细胞增殖旺盛之后会自然消失,除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话,可以增加细胞的种板密度,以提高细胞的生存率。
5)真菌:一般培养液清亮,不变色,镜下有丝状物,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了,也很难救活了。
6)支原体:黑色的,好象多为多形,培养液一般培养液一般会浑浊,原体感染,国内血清很多都没有做支原体阴性检测,而支原体是牛血清中zui常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后,细胞病变不很明显,只是慢慢。用泰乐菌素,兽用支原体病的药,但可用于细胞培养,无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长就是操作的问题。 也可以在培养基中事先加入双抗(和氨苄)。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。1、孵箱应定期用三氧机消毒或者 紫外光照射,并用酒精和新洁尔灭试擦孵箱同时孵箱内的水应是三蒸水2、超净台\取材\器材\培养液\培养瓶\操作等因素3、超净台的风机不能过大,风机到6-8格。否则也可能能致霉菌污染4、无菌室经甲醛熏蒸消毒后,可用同等量的氨水喷洒中和,约几小时即可进入操作。
抗缪勒管激素(AMH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Anti Mullerian Hormone (AMH) Homo sapiens (Human)
POTE锚蛋白域家族成员G(POTEG)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG) Homo sapiens (Human)
磷酸性磷酸酶(PSPH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Phosphoserine Phosphatase (PSPH) Homo sapiens (Human)
磷酸转氨酶1(PSAT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Phosphoserine Aminotransferase 1 (PSAT1) Homo sapiens (Human)
羟甲基转移酶2(SHMT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Serine Hydroxymethyltransferase 2, Mitochondrial (SHMT2) Homo sapiens (Human)
磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Phosphoglycerate Dehydrogenase (PHGDH) Homo sapiens (Human)
合成酶(GS)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Glutamine synthetase (GS) Mus musculus (Mouse)
猫眼综合征染色体区候选基因1(CECR1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Cat Eye Syndrome Chromosome Region, Candidate 1 (CECR1) Homo sapiens (Human)
骨织素(OSTN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Osteocrin (OSTN) Homo sapiens (Human)
软骨寡聚基质蛋白(COMP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) Homo sapiens (Human)
软骨寡聚基质蛋白(COMP)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Cartilage Oligomeric Matrix Protein (COMP) Rattus norvegicus (Rat)
溶酶体关联膜蛋白2(LAMP2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Lysosomal Associated Membrane Protein 2 (LAMP2) Mus musculus (Mouse)
血管紧张素1-7(Ang1-7)检测试剂盒(化学发光免疫分析法) CLIA Kit for Angiotensin 1-7 (Ang1-7) Canis familiaris; Canine (Dog)