Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒原理与实验室保管技术分享
来源：2026/6/26 8:38:4523
导读:
细胞凋亡是生命科学、药物筛选、免疫机制研究中的常规检测指标，Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒凭借双荧光标记体系，成为实验室流式检测细胞凋亡的常用工具，本次结合伊莱瑞特 E-CK-A211 型号产品，分享原理、实操要点与试剂保管相关内容。
研发该款凋亡试剂盒的武汉伊莱瑞特生物成立于 2011 年，扎根武汉光谷生物城，专注免疫检测试剂研发生产，产品线覆盖细胞功能检测、ELISA、流式标记试剂等，产品仅供科研场景使用，不用于临床诊断，配套完整实验缓冲体系，适配高校、药企实验室常规细胞样本检测需求。
这款凋亡试剂盒依托磷脂结合与核酸染色双重机制区分细胞状态。正常细胞磷脂酰氨酸仅分布在细胞膜内侧，凋亡早期细胞膜外翻暴露磷脂酰氨酸，试剂盒内标记 FITC 荧光的 Annexin V 可依靠钙离子结合位点特异性结合该结构，FITC 激发波长 490nm，发射波长 530nm，可通过流式 FITC 通道捕捉信号。PI 作为核酸染料无法穿透完整细胞膜，仅能进入膜破损的晚期凋亡与坏死细胞，结合双链 DNA 产生红色荧光，二者搭配可在流式散点图中区分正常、早期凋亡、晚期凋亡、坏死四类细胞，减少单染造成的结果混淆。
完整检测流程整体耗时约 40 分钟，仅需细胞样本，实验前自行准备 PBS 与去离子水即可开展。收集细胞时需要同步收取漂浮的凋亡细胞与消化后的贴壁细胞，经预冷 PBS 洗涤两次，用试剂盒配套含钙离子结合缓冲液重悬细胞，避光加入两种荧光染料室温孵育 15 分钟后上机，全程避光操作可避免荧光染料降解，降低假阴性概率。
试剂长期稳定依赖规范储存与运输，整套凋亡试剂盒需放置在 2 至 8 摄氏度避光环境，有效期为 12 个月。货物运输采用冰袋冷链包装，收到试剂后不可冷冻存放，冰箱门架温度波动较大，建议放置冰箱内层固定区域。日常取用后及时拧紧瓶盖，减少光照与室温暴露时长，反复温差会降低荧光标记物活性，造成实验信号偏弱。该产品现货供应，单次规格可完成 20 次细胞检测，已有多篇免疫领域高分期刊相关研究引用同款试剂盒开展细胞稳态相关实验，数据具备参考性。
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