人单个核细胞分离液1.077储存
来源：未来仪器2026/10/28 16:39:403
导读:
一、人单个核细胞分离液1.077储存：
其对光敏感，应该室温避光储存，保质期 2 年。无菌开封后，保存于室温。
二、使用说明：
1. 取新鲜抗凝全血(EDTA、枸橼·酸钠或肝素抗凝均可)，用等体积的全血及组织稀释液或者PBS稀释全血。
2. 在离心管中加入适量分离液(当稀释后血液体积小于3mL时，加入3mL分离液；大于等于3mL，加入等体积分离液。但二者的总体积不能超过离心管的三分之二，否则会影响分离效果)，将稀释后的血液平铺到分离液液面上方，注意保持两液面界面清晰。(可以使用巴氏德吸管吸取血液，然后将血液小心的平铺于分离液上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。如果样品较多加样时间较长，在离心之前会出现红细胞成团下沉属正常现象。)
3. 室温，水平转子500~1000g，离心20~30min(血液的体积越大所需的离心力越大，离心时间越长，很好的分离条件需摸索，离心转速大不超过1200g)。
4.离心后将出现明显的分层：上层是稀释的血浆层，中间是透明的分离液层，血浆与分离液之间的白膜层即为单个核细胞层，离心管底部是红细胞与粒细胞。
5. 小心的吸取白膜层细胞到15mL洁净的离心管中，10mL PBS或细胞洗涤液洗涤白膜层细胞。250g，离心10min。
6. 弃上清，5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞，250g，离心10min。
7. 重复步骤6。
8. 弃上清，细胞重悬备用。
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